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顶空气相色谱系列讲座(17)
点击次数:1162 发布时间:2015-08-31

顶空气相色谱系列讲座(17)  
人体血液中一氧化碳的分析——定量分析4  





二、氯化钯法

原理——碳氧血红蛋白与酸作用,释放出CO气体,它能定量地与氯化钯作用。然后用紫外分光光度法测定反应后氯化钯溶液的浓度,从剩余氯化钯的量可求碳氧血红蛋白的饱和率。

操作——1. 取扩散吸收池一个,在内槽中加入 3.0mL C(PdCl2 = 0.0025)mol/L溶液,在外槽一侧加1.0mL C(H2SO4=1.8)mol/L溶液

              2. 取检材血0.5mL置外槽另一侧,立即盖严盖子,轻轻旋转倾斜使硫酸与血混合,如室温<5℃需水浴上稍加热,放置1~2小时

3. 取出内槽中的氯化钯溶液,过滤,滤液转入50mL容量瓶中,用0.1mol/L盐酸洗涤内槽三次,洗液滤入容量瓶中,然后用0.1mol/L盐酸稀释至刻度,混匀后放置待测。

4. 取容量瓶中的清液置石英杯中,以0.1mol/L盐酸作参比, 278nm处测紫外吸收。

5. 分别吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL( PdCl2 =0.025)mol/L溶液置50mL容量瓶中,用用0.1mol/L盐酸稀释至刻度,同上平行操作分别测紫外吸收,得到氯化钯的标准曲线。




计算——将检血的氯化钯吸收值与标准氯化钯溶液的吸收值作比较,求出剩余氯化钯容量,再求出相应的CO容量(见相关值表),然后根据检材血的血红蛋白含量计算碳氧血红蛋白饱和率。

氯化钯与一氧化碳相关值表

剩余 PdCl2(ml/50ml) CO(ml/100ml)   


碳氧血红蛋白计算公式如下:

   HbCO% =     CO容量(ml/100ml)×100 ÷  血红蛋白(g/100ml)×1.35



注意——1. 此法对新鲜检材血可不考虑干扰问题,如是腐败检材血,可用醋酸铅-醋酸

          溶液代替1.8mol/L硫酸溶液,以除去硫化物的干扰。

              2. 醋酸铅-醋酸溶液配制,取10mL冰醋酸用水稀释至100mL ,加醋酸铅至饱

          和。

              3. 为保证检材血和标准系列血中的血红蛋白的浓度一致,平均校正因子为

          1.35

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